产品介绍
PAGE 凝胶快速制备试剂盒使用说明书
产品简介
本产品现已配套提供改良型过硫酸铵催化剂溶液,提高了过硫酸铵溶液的稳定性和催化效能。请将此过硫酸铵溶液保存于-20℃。为方便吸取使用,已开盖使用中的过硫酸铵溶液可置于 4℃保存。
使用本产品凝胶制备试剂无需加入有极臭异味且有毒的 TEMED 试剂,只需加入过硫酸铵即可凝胶,使研究人员可避免因操作 TEMED 而带来的不快和对健康的影响。配制一块或多块凝胶最少只需 2 分钟的动手操作时间。特有颜色配方的浓缩胶,使点样孔清晰易辨,方便点样。多种颜色设计,更能轻易区分含不同样品的凝胶。所含颜色配方不影响电泳,染色及转膜等后续应用。本试剂盒灌制的凝胶也可用于非变性 PAGE 凝胶电泳。
注意:本产品常温运输,保存于 2-8℃,保质期 12 个月。彩色预混浓缩胶缓冲液在储存过程中可能产生少量沉淀,属于正常现象,请放心使用。
◆货号规格
PG110: 可制备 125 个 6%的 mini 胶(0.75 mm)
PG111: 可制备 125 个 7.5%的 mini 胶(0.75 mm);
PG112: 可制备 125 个 10%的 mini 胶(0.75 mm);
PG113: 可制备 125 个 12.5%的 mini 胶(0.75 mm);
PG114: 可制备 125 个 15%的 mini 胶(0.75 mm);
◆产品内容
分离胶缓冲液(2×)250ml
分离胶溶液(2×)250ml
彩色浓缩胶缓冲液(2×)80ml
浓缩胶溶液(2×)80ml
改良型过硫酸铵溶液 8 ml
◆产品特点
1.快速制备凝胶——最少只需 2 分钟的动手操作时间即可灌制多块凝胶,无需计算所需溶液量,无需稀释。
2.彩色浓缩胶——可制备红黄绿三种颜色的浓缩胶,为点样和区分不同凝胶提供最大便利。
3.避免操作有毒及异味的试剂——无需使用 TEMED,避免恶臭气味。
制胶流程(以一块 0.75/ 1.0/ 1.5 mm 的 mini 胶为例)
1. 取等体积分离胶缓冲液和分离胶溶液混匀,即取两种溶液各 2.0/ 2.7/ 4.0 ml。
2. 往步骤 1 中的混合溶液中加入 40/ 60/ 80μl 的改良型过硫酸铵溶液,混匀。
3. 将步骤 2 中的溶液注入制胶玻璃板中,加入适量水或醇(如乙醇、正丁醇等)覆盖于分离胶之上。
4. 待分离胶凝固后,倒去上层水或醇。
5. 取等体积浓缩胶缓冲液和浓缩胶溶液混匀,即取两种溶液各 0.5/ 0.75/ 1.0 ml,加入10/ 15/ 20μl 的改良型过硫酸铵溶液,混匀。
6. 注入制胶玻璃板中,插入梳齿。
7. 待浓缩胶凝固后,拔去梳齿即可用于电泳。
◆Tips:
1. 改良型过硫酸铵溶液的使用量仅作参考,实际用量可根据个人实验习惯和经验增加或减少。加入较多量的过硫酸铵可加快凝胶速度,反之亦然。
2. 本产品已加入适量 TEMED 的替代品,如需进一步加快凝胶速度,临配胶前可按需补充适量 TEMED。
3. 凝胶过程中产生气泡的原因:空气在溶液中的溶解度随着温度的升高而降低;低温储存的溶液溶解较多的空气;凝胶的凝聚是一个放热反应,同时低温溶液在室温环境下缓慢吸热。两者共同促成凝胶温度的升高,使得其溶解的空气因溶解度降低而释放出来,形成气泡。因此,在将凝胶溶液灌制到玻璃板中之前,使之平衡到室温(如放置几分钟),可有效避免凝胶中气泡的形成。
4. 尽管整个凝固反应是一个放热反应,但是这是一个多步骤的反应,最初反应的触发仍然需要较多的热能。实践证明,胶的凝固与温度有显著的正相关性。同等条件下,温度越高,凝固速度越快。如 25℃时的凝固速度要显著快于 15℃时的凝固速度。同理,在 37℃ 时,凝固速度会进一步加快。